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高壓滅菌器屬于強檢儀器，但強檢只是對儀器物理參數(shù)的考核。所以做過強檢的滅菌器還必須進行滅菌效果的驗證。一些單位常常忽略了這個重要的問題。國內(nèi)市售 的手提滅菌器，往往儀器指針達到所需的溫度，但滅菌物品的實際溫度卻未達到要求。導(dǎo)致滅菌物品不*，影響實驗結(jié)果。因此高壓蒸氣滅菌器無菌效果的驗證是一個必須引起重視的問題。

實施驗證通常可以分階段驗證,即把整個驗證方案分成安裝確認,運行確認和性能確認三個階段分段實施。安裝確認:主要指機器設(shè)備安裝后各種系統(tǒng)檢查活動及技術(shù)資料完整性的

文件化工作。運行確認:為設(shè)備達到規(guī)定要求而進行的運行試驗。性能確認:常指模擬生產(chǎn)生產(chǎn)試驗。本文主要講tomy高壓滅菌鍋性能確認，方法如下：

1．試驗材料
(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillus  stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5 CFU/片。
(2) 121℃壓力蒸氣滅菌化學指示卡。
(3)溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓滅菌20分鐘后備用。
(4)O-150℃留點溫度計。

2．方法與結(jié)果
     將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡稱菌片）用無菌鑷子放人密封試管中。化學指示卡和留點溫度計放入敞口試管中。以上兩種試管各準備5-10份。分別放置在高壓滅菌器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層，則需放10處。
     留點溫度計標化合格后方可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應(yīng)存1℃之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。
     滅菌后的菌片應(yīng)在嚴格無菌操作條件下放入滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)56-60℃培養(yǎng)24-48小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜 熱脂肪芽胞桿菌尚未*滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽胞已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片 放入培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照。
     化學指示卡上的指示色塊，在高壓蒸氣滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏ｋS著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求。化學指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。
     高壓蒸氣滅菌必須使蒸氣順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2/3)。二種驗證各重復(fù)三次，共做六次。
     5個點六次試驗表明溫度均在121℃，化學指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明高壓蒸氣滅菌效果合格。
     通過了以上的檢測、驗證后高壓滅菌器可以投入正常的使用,但是經(jīng)過一段時間的使和維修后必需進行再驗證。